近些年,PCR技术凭借灵敏度高、要求低、特异性高等特点,被广泛应用于各种临床诊断。
PCR技术要想应用,设计PCR实验室是必须的,而且PCR实验室需要合理设计,才能保ZHENG检测结果是可靠的。
于是,PCR实验室在目前国内二级以上的医院,是深受重视的,小编就给大家分析一下PCR实验室平面布局的设计要点,供设计同行和各大医院的相关人员参考。
PCR实验室一般由试剂储备区、标本制备区、扩增区、扩增分析区4个区域组成。
PCR实验室区域的设置不是一成不变的,有几种情况需要去注意一下:
(1)需要增加一个区域用于样品的粉碎,这是由于样本在扩增之前需要粉碎处理。
(2)采用实时荧光PCR法的时候,扩增区和分析区可以合并为一个区。
(3)采用全自动化PCR分析仪的时候,标本制备区、扩增区和分析区这三个区可以合并为一个区。
区域与设备设计要点:
接下来,我们分别来说明一下4个区域。
试剂储备区的任务是完成试剂和主反应混合液的储存、配制和封装工作,该区域的设备主要是冰箱、天平、混匀器、低速离心机、加样器、可移动紫外灯等。
由于试剂储备区存在多种试剂,在设计的时候zui应该考虑的因素就是AN全。具体我们可以做这些操作:
整个区域应保持通风流畅、逃生畅通。
实验台布置在房间的两侧,中间的过道全部通向走廊便于疏散。
实验台与实验台通道设计为1500mm,中间的通道可满足两边坐人,中间过人的要求。
扩增区的功能是DNA扩增和扩增片段的测定,该区域的设备主要是核酸扩增热循环仪、加样器、超净台等。
与标本制备区相同,扩增区也会有气溶胶导致的污染发生。所以,在使用扩增区的时候,应该减少不必要的走动。
分析区的功能是扩增产物的分析,该区域的设备主要是加样器、电泳仪(槽)、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、酶标仪和洗板机等。
分析区域可能会用到一些有毒物质,所以,实验人员要进行AN全防护。
分析区是PCR实验的zui后一步,压力应为zui低。
路径的设计包括两种:工作人员和物品。
工作人员进入实验室的路径应为:走道→缓冲间→实验区
工作人员离开实验室的路径应为:实验区→缓冲间→走道
工作人员进入各个区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服,而且不得将工作服带出。
这样主要是为了降低因人员的流动带来的交叉污染风险。
物品进入实验区必须经过双扉互锁传递窗,利用传递窗肖毒后才可进入。
实验室内所有物品需要经过传递窗,才可以传递到实验室以外的清洁公共区。
这样主要是为了降低物品的差错和混淆的风险。
了解了这些设计要点,PCR实验室才能更好的被利用起来。
标本制备区的功能是保存样本、提取和贮存核酸、样本加入扩增反应管和测定DNA的合成,样本应直接运送至该区域。标本制备区的设备主要是生物AN全柜、加样器、台式高速离心机、台式低速离心机、水浴锅、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。
使用标本制备区的时候,要特别注意,此区域操作的时候可能产生气溶胶,为避免出现污染情况,应该对外界保持负压。
此外,生物AN全柜zui好选用B2型,它可以避免提取核酸在柜内反复循环,造成标本之间交叉污染。